共聚焦顯微鏡的基本原理

共聚焦顯微鏡的基本原理　　傳統(tǒng)的光學顯微鏡使用的是場光源，標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾；激光掃描共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對標本內(nèi)焦平面的每一點掃描，標本上的被照射點，在探測針孔處成像，由探測針孔后的光電倍增管（PMT）或冷電耦器件（cCCD）逐點或逐線接收，迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔，焦平面以外的點不會在探測針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學橫斷面，克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點?！　」簿劢癸@微鏡的生物領域　　細胞形態(tài)學分析（觀察細胞或組織內(nèi)部微細結構，如：細胞內(nèi)線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、微管、微絲、細胞橋、染色體等亞細胞結構的形態(tài)特征；半定量免疫熒光分析）；熒光原位雜交研究；基因定位研究及三維重建分析。　?、奔毎飳W：細胞結構、細胞骨架、細胞膜結構、流動性、受體、細胞器結構和分布變化　?、采锘瘜W：酶、核酸、FISH（熒光原位雜交）、受體分析　?、乘幚韺W：藥物對細胞的作用及其動力學　　⒋生理學：膜受體、離子通道、細胞內(nèi)離子含量、分布、動態(tài)　　⒌神經(jīng)生物學：神經(jīng)細胞結構、神經(jīng)遞質(zhì)的成分、運輸和傳遞、遞質(zhì)受體、離子內(nèi)外流、神經(jīng)組織結構、細胞分布　?、段⑸飳W和寄生蟲學：細菌、寄生蟲形態(tài)結構　?、凡±韺W及臨床應用：活檢標本診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病診斷、HⅣ等　?、高z傳學和組胚學：細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結構、染色體分析、基因表達、基因診斷　　醫(yī)學領域編輯　　共聚焦顯微鏡已經(jīng)在各種醫(yī)學領域廣泛應用，分類如下：　　生物學　?、保患毎?、組織的三維觀察和定量測量　?、玻换罴毎硇盘柕膭討B(tài)監(jiān)測　?、?；粘附細胞的分選　　⒋；細胞激光顯微外科和光陷阱功能　?、担还馄缀蟮臒晒饣謴汀　、?；在細胞凋亡研究中的應用　　神經(jīng)科學　?、?；定量熒光測定　?、?；細胞內(nèi)離子的測定　?、常簧窠?jīng)細胞的形態(tài)觀察　　耳鼻喉學　?、?；在內(nèi)耳毛細胞亞細胞結構研究上的應用　　⒉；激光掃描共聚焦顯微鏡的熒光測鈣技術在內(nèi)耳毛細胞研究中的應用　?、常患す鈷呙韫簿劢癸@微鏡在內(nèi)耳毛細胞離子通道研究上的應用　　⒋；激光掃描共聚焦顯微鏡在嗅覺研究中的應用　　腫瘤學　?、倍棵庖邿晒鉁y定　?、布毎麅?nèi)離子分析　?、硤D像分析：腫瘤細胞的二維圖像分析　　⒋三維重建　　內(nèi)分泌學　?、奔毎麅?nèi)鈣離子的測定　　⒉免疫熒光定位及免疫細胞化學研究　?、臣毎螒B(tài)學研究：利用激光掃描共聚焦顯微鏡　　血液病　?、痹谘毎螒B(tài)及功能研究方面的應用　?、苍诩毎蛲鲅芯恐械膽谩　⊙劭茟谩　、崩眉す鈷呙韫簿劢癸@微鏡觀察組織、細胞結構　　⒉集合特殊的熒光染色在活體上觀察角膜外傷修復中細胞移行及成纖維細胞的出現(xiàn)　?、忱眉す鈷呙韫簿劢癸@微鏡觀察視網(wǎng)膜中視神經(jīng)細胞的分布以及神經(jīng)原的樹枝狀形態(tài)　　⒋三維重建　　腎臟病　　可以系統(tǒng)觀察正常人腎小球系膜細胞的斷層掃描影像及三維立體影像水平，使圖像更加清晰，從計算機分析系統(tǒng)可從外觀到內(nèi)在結構，從平面到立體，從靜態(tài)到動態(tài)，從形態(tài)到功能幾個方面對系膜細胞的認識得到提高。