高效液相色譜儀的使用和維護(hù)保養(yǎng)

高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。由于液相色譜分析技術(shù)涉及的樣品種類繁多、樣品組成及其濃度復(fù)雜，樣品物理形態(tài)多變，對(duì)液相色譜儀的正常分析測定造成一些干擾因素，如果不注意儀器的維護(hù)和保養(yǎng)，會(huì)對(duì)日常的分析測定帶采不便，所以需要對(duì)儀器的使用以及維護(hù)要做一些了解才能熟練掌握這種分析技術(shù)。高效液相色譜儀的操作過程：1.翻開HPLC工作站（包含計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀），銜接好活動(dòng)相管道，銜接檢測體系。2.對(duì)抽濾后的活動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。3.過濾活動(dòng)相，根據(jù)需求挑選不一樣的濾膜。4進(jìn)入HPLC操控界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。5.有一段時(shí)刻沒用，或許換了新的活動(dòng)相，需求先沖刷泵和進(jìn)樣閥。沖刷泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖刷進(jìn)樣閥，需求在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖刷時(shí)速度不要超越10ml/min。6.調(diào)理流量，初度運(yùn)用新的活動(dòng)相，能夠先試一下壓力，流速越大，壓力越大，通常不要超越2000。點(diǎn)擊injure，選用適宜的流速，點(diǎn)擊on，走基線，調(diào)查基線的狀況。7.規(guī)劃走樣辦法。點(diǎn)擊file，選擇select?users?and?methods，能夠選擇現(xiàn)有的各種走樣辦法。若需樹立一個(gè)新的辦法，點(diǎn)擊new?method。選擇需求的配件，包含進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需求而不一樣。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣辦法需求包含：a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流，通常2-5分鐘；b.基線歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject變換；d.走樣時(shí)刻，隨不一樣的樣品而不一樣。8.進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣辦法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，一切的樣品均需過濾。辦法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記載數(shù)據(jù)和做符號(hào)等。悉數(shù)樣品走完后，再用上面的辦法走一段基線，洗掉剩余物。9.關(guān)機(jī)時(shí)，先關(guān)計(jì)算機(jī)，再關(guān)液相色譜儀。高效液相色譜儀操作注意事項(xiàng)：1、液相色譜儀的流動(dòng)相應(yīng)采用色譜純?nèi)軇?，以滿足要求、避免損壞色譜柱2、待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾，以避免堵塞、損壞色譜柱;3、液相色譜儀流動(dòng)相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用;4、嚴(yán)禁使用有污染的水等沖洗色譜柱，避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi);5、液相色譜儀分析完成后，須注意及時(shí)清洗色譜柱和檢測器的比色池。